上篇文章我們介紹了Tris緩沖劑的優(yōu)點,本篇文章我們來介紹一下Tris緩沖劑在使用中的注意事項吧!
使用Tris緩沖劑的注意事項:
1. Tris緩沖液的pH值受溫度影響大,△pKa/℃=-0.031 ,例如:4℃時緩沖液的pH=8.4,則37℃時的pH=7.4,所以一定要在使用溫度下進行配制,室溫下配制的Tris-HCl緩沖液不能用于0℃~4℃。
2. Tris緩沖液的pH值受溶液濃度影響較大,緩沖液稀釋十倍,pH值的變化大于0.1
3. Tris在一定程度上與各種分子反應(yīng),包括RNA酶抑制劑,醛,酶,DNA以及常見金屬如Cr3+,F(xiàn)e3+,Ni2+,Co2+和Cu2+等,在有些系統(tǒng)中會起抑制作用,在配制過程中需考慮與其他組分之間的相互作用;
4. Tris緩沖液易吸收空氣中的CO2,配制的緩沖液要注意蓋嚴密封;
5. Tris緩沖液對某些pH電極發(fā)生一定的干擾作用,需使用與Tris溶液具有兼容性的電極;
6. Tris緩沖液不適用于二喹啉甲酸(BCA)測定;
7. 吸入,攝入,皮膚吸收Tris可造成傷害,操作時需戴好手套和護目鏡;
8. 作為蛋白緩沖液時,若后續(xù)工作需要質(zhì)譜,則不適宜用Tris,最好換成其他質(zhì)譜儀可耐受的緩沖液。